Mixquiahuala
de Juárez hgo, a 3 de Octubre del 2013.
Método
de concentración por sedimentación “Ritchie”
Fundamento
Se
basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la
centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los
elementos parasitarios.
Unas ventajas que tiene ése método es concentrar y no deformar las formas
parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal
procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para la
evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.
Material
y equipo
Centrifuga
Tubos de ensaye cónicos de 15 ml
Gasa cortada en cuadros
Embudos de polietileno
Vasos de precipitado de 5 ml
Aplicadores de madera
Pipetas Pasteur con bulbo
Portaobjetos de 26 x 76 mm
Cubreobjetos de 22 x 22 mm
Microscopio
Solución salina isotónica
Solución de formaldehido al 10%
Éter
Método
a)
Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. de la materia fecal
en el vaso de precipitados, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.
b) Se filtra la suspensión a través de la gasa
colocada en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.
c) Se centrifuga la suspensión durante 2 minutos a
2000 rpm
d) Se decanta el sobrante y se resuspende el
sedimento con solución salina, centrifugando, decantando y resuspendiendo 2
veces mas.
e) Al último sedimento se agregan 10 ml de solución
de formaldehído al 10% se mezcla y se deja reposar durante 10 minutos.
f) Se añaden después 5 ml de éter, se tapan los
tubos con tapones de caucho y se agitan enérgicamente durante 30 segundos.
g) Se centrifuga durante 2 minutos a 2000 rpm
h) Después de centrifugar se observan 4 capas:
* Éter e la superficial.
*Un tapón de restos fecales.
*Formaldehído.
*Sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.
i) Se decanta el sobrante.
j) Se introduce la pipeta Pasteur hasta el
sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en un
portaobjetos.
k) Se le añade una gota de lugol y con uno de los
ángulos del cubreobjetos se homogeniza, cubriéndolo con el mismo.
l) Se observa la preparación en el microscopio con
objetivos de 10X y 40X.
Imágenes de la Práctica..
