IDENTIFICACIÓN DE CÉLULAS EUCARIOTAS Biología Contemporánea

IDENTIFICACIÓN DE CÉLULAS EUCARIOTAS

Biología Contemporánea

 Las células eucariotas poseen un núcleo definido con el material genético organizado en cromosomas. Todos los organismos multicelulares están formados por células eucariotas y también muchos organismos unicelulares y coloniales.

Material

- 1 microscopio optimo
- 5 portaobjetos
- 5 cubreobjetos
- 1 agitador
- 1 bisturí con navaja
- 1 vaso de precipitado
- 2 goteros
- 1 servilleta de papel
- 1 trozo de papel de seda
- 1 caja de Petri

Sustancias
- Agua destilada
- Reactivos de Gram: cristal violeta, lugol, alcohol-cetona, safranina
- Sudan III
- Yogurt casero
- Agua de charco o de florero
- Cebolla, papa, plátano, manzana, papaya, aguacate, nuez, zanahoria, betabel
- Flores de gladiola roja

Procedimiento
Células bacterianas Las bacterias son células muy pequeñas (1 a 2 micrómetros ) y pueden tener forma esférica ( cocos), de bastón bacilos) o de espiral (espirilos).

1.           Haz un frotis de una muestra de yogurt.

2.           Realiza una tinción con Gram.

3.           Colócale un portaobjetos y obsérvalo a inmersión.

4.           Identifica la forma de la célula, la pared y el citoplasma.

5.           Dibuja los esquemas en los cuadros para resultados.

Bacterias verde-azules (cianobacterias):

Las cianobacterias son organismo procariontes fotosintéticos. La clorofila que contiene esta dispersas en el citoplasma. Además de la clorofila, las cianofitas poseen pigmentos accesorios (carotenoides y ficobilinas).

1.           Coloca sobre un portaobjeto una gota de agua de charco estancado y verde-azul.

2.           Coloca un cubreobjetos y observa al microscopio con el objetivo seco fuerte.

3.           Dibuja lo observado y señala las estructuras celulares identificadas.

Pared celular y núcleos en células de catafilia de cebolla

 La cebolla es un tallo del cual nacen hojas modificadas llamadas catafilias, que no poseen clorofila y almacenan gran cantidad de carbohidratos.

1.           Desprende con una pinza la epidermis interna de un trozo de catafilia de cebolla.

2.           Coloca una pequeña porción de la película sobre un portaobjetos, añádele una gota de agua y una de lugol y acopla un cubreobjetos.

3.           Observa con los objetivos de seco débil y seco fuerte.

4.           Dibuja lo observado y señala las estructuras celulares identificadas.

Cloroplastos y pared celular en células de hoja de elodea

Las hojas de Elodea se pueden observar al MO sin ninguna preparación previa ya que están formadas por dos capas de células.

1.           Coloca una hojita de elodea sobre un portaobjetos 

2.           Agrégale una gota de agua y colócale el cubreobjetos.

3.           Observar a seco débil y fuerte.

4.           Dibuja las células t señala las estructuras identificadas.

 Aminoplastos en tuberculos de papa.

Los aminoplastos son plastidiosque contienen el almidón presente en el tubérculo de la papa.

1.           Corta un trozo de tubérculo de papa y raspa la superficie de corte con una hoja de afeitar o de bisturí.

2.           Coloca el raspado en una gota de agua y raspa sobre un cubreobjetos

3.           Agrega una gota de Lugol.

4.           Acopla un portaobjetos y observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.

5.           Localiza los aminoplastos teñidos de azul.

6.           Dibuja las células y señala las estructuras identificadas.

Aminoplastos en plátano.

Las células de plátano también poseen aminoplastos que almacenan almidón pero que se diferencias de los aminoplastos de la papa en su morfología.

1.           Raspa una pequeña cantidad de tejido de la superficie del fruto.

2.           Dispérsala sobre el portaobjetos.

3.           Agrega una gota de Lugol.

4.           Coloca un cubreobjetos y observa con el objetivo seco débil y seco fuerte.

5.           Dibuja las células y señala los almidones identificados.

6.           Compara la morfología de los amiloplastos de papa y de plátano.

7.           Repite el procedimiento anterior con manzana y papaya. Compara la estructura de los amiloplastos.

Cromoplastos de zanahoria y betabel.

En la zanahoria y el betabel, así como en otras partes de distintas especies de plantas, se encuentran cromoplastos que contienen pigmentos amarillos, naranjas o rojos, llamados carotenos.

1.           Corta una delgada capa de tejido de la porción más extensa de la zanahoria.

2.           Colócala sobre una gota de agua en el portaobjetos.

3.           Acopla un cubreobjetos.

4.           Observar con el objetivo seco débil y seco fuerte. Los cromosomas están teñidos naturalmente.

5.           Dibuja las células y señala los cromoplastos identificados.

6.           Procede del mismo modo con el betabel.

Cromoplastos en flores coloridas.

Las flores coloridas de color entre azul y rojo contienen en los cromoplastos unos pigmentos llamados antocianinas.

1.           Desprende la epidermis de los mas delgada posible de una flor colorida, puede ser gladiola.

2.           Colócala sobre un portaobjetos con una gota de agua destilada y cúbrela con el cubreobjetos.

3.           Observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.

4.           Dibuja las células y señala los cromoplastos identificados.

Oleoplastos en células de aguacate o nuez

Son plástidos que almacenan aceites como reserva de compuestos energéticos.

1.           Haz un raspado del aguacate (o macerado de la nuez y coloca una pequeña porción sobre un cubreobjetos con una  gota de agua.

2.           Agrega una gota del colorante de sudan III

3.           Observa con el objetivo seco débil y seco fuerte. Los oleoplastos se ven de color naranja.

4.           Dibuja las células y señala los oleoplastos identificados.

Células animales

1.           Con un portaobjetos y muy cuidadosamente haz un raspado de la cara interna del labio inferior.

2.           Extiende la masilla que quedo en el borde del portaobjetos y mezcla con una gota de agua destilada.

3.           Agrega una gota de safranina y coloca el cubreobjetos.

4.           Observa con el objetivo seco débil y seco fuerte.

5.           Dibuja las células y señala las partes identificadas.

Conclusiones:

El nombre de célula eucariota es aquel que se aplica a todas las células de un organismo vivo que poseen una membrana que las recubre y protege del ambiente exterior, pero especialmente por tener un núcleo celular  definido y delimitado también dentro de la célula por una capa protectora o membrana nuclear. Las células eucariotas se diferencian de otro tipo de células como por ejemplo las células procariotas en las cuales el núcleo también existe pero al no estar recubierto por ninguna membrana o envoltura se halla disperso por toda la célula.

HCG

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE LA HORMONA GONOGOTROPINA CORIONICA HUMANA (HCG)

PRINCIPIO DEL MÉTODO
 La prueba de HCG-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección directa cualitativa de la HCG en orina y suero humanos. Las partículas de látex recubiertas con anticuerpo monoclonal anti-HCG (Nota 1) son aglutinadas por moléculas de HCG presentes en la muestra del paciente. 


SIGNIFICADO CLÍNICO
La HCG es una hormona secretada por la placenta de la mujer embarazada que aparece relativamente pronto en sangre y orina después de la implantación del embrión fecundado. Puede ser detectada en orina a partir del tercer día de la perdida del periodo menstrual y su concentración sigue aumentando hasta 


CALIBRACION
La sensibilidad del reactivo de látex está estandarizada frente al 3º Patrón Internacional de HCG 75/537 de NIBS (UK).

 CONSERVACION Y ESTABILIDAD Todos los componentes del kit están listos para su uso, y son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, y se evita la contaminación durante su uso. No congelar: la congelación de los reactivos altera irreversiblemente la funcionalidad de éstos. Indicadores de deterioro de los reactivos: Presencia de partículas y turbidez. 

MATERIAL ADICIONAL 
- Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 80-100 r.p.m. 
-Agitador vortex
-Pipetas de 50 ml 

MUESTRAS 
-Orina o suero fresco (Nota 2). Se recomienda utilizar la orina de la primera hora de la mañana, ya que generalmente contiene mayor concentración de hormona.
- Muestras de orina: estable 48 horas a 2-8ºC o 3 meses a –20ºC. 
-Muestras de suero: estables 7 días a 2-8ºC o 3 meses a –20ºC. 
Las muestras de suero u orina que presentan turbidez deben centrifugarse antes de la prueba. 
No utilizar muestras de suero altamente hemolizadas o lipémicas. 


PROCEDIMIENTO 
1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas. 
2. Depositar 100 µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de un porta. 
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de HCG- látex antes de usar. Depositar una gota (50 µL) junto a cada una de las gotas anteriores. 
4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra. 
5. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80–100 r.p.m. durante 2 minutos


LECTURA E INTERPRETACION
Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación
inmediatamente después de retirar el porta del agitador. La presencia
de aglutinación indica una concentración de HCG igual o superior a
200 UI/L.


CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la
funcionalidad del reactivo de látex, así como modelo de comparación
para la interpretación de los resultados.


VALORES DE REFERENCIA
Suero: 5 – 50 UI/L entre 0,2 – 1 semana de gestación.
Orina: 50 – 5000 UI/L entre 1 – 2,5 semanas de gestación.
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores
de referencia.

RESULTADO:

NEGATIVO