HCG

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE LA HORMONA GONOGOTROPINA CORIONICA HUMANA (HCG)

PRINCIPIO DEL MÉTODO
 La prueba de HCG-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección directa cualitativa de la HCG en orina y suero humanos. Las partículas de látex recubiertas con anticuerpo monoclonal anti-HCG (Nota 1) son aglutinadas por moléculas de HCG presentes en la muestra del paciente. 


SIGNIFICADO CLÍNICO
La HCG es una hormona secretada por la placenta de la mujer embarazada que aparece relativamente pronto en sangre y orina después de la implantación del embrión fecundado. Puede ser detectada en orina a partir del tercer día de la perdida del periodo menstrual y su concentración sigue aumentando hasta 


CALIBRACION
La sensibilidad del reactivo de látex está estandarizada frente al 3º Patrón Internacional de HCG 75/537 de NIBS (UK).

 CONSERVACION Y ESTABILIDAD Todos los componentes del kit están listos para su uso, y son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, y se evita la contaminación durante su uso. No congelar: la congelación de los reactivos altera irreversiblemente la funcionalidad de éstos. Indicadores de deterioro de los reactivos: Presencia de partículas y turbidez. 

MATERIAL ADICIONAL 
- Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 80-100 r.p.m. 
-Agitador vortex
-Pipetas de 50 ml 

MUESTRAS 
-Orina o suero fresco (Nota 2). Se recomienda utilizar la orina de la primera hora de la mañana, ya que generalmente contiene mayor concentración de hormona.
- Muestras de orina: estable 48 horas a 2-8ºC o 3 meses a –20ºC. 
-Muestras de suero: estables 7 días a 2-8ºC o 3 meses a –20ºC. 
Las muestras de suero u orina que presentan turbidez deben centrifugarse antes de la prueba. 
No utilizar muestras de suero altamente hemolizadas o lipémicas. 


PROCEDIMIENTO 
1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas. 
2. Depositar 100 µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de un porta. 
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de HCG- látex antes de usar. Depositar una gota (50 µL) junto a cada una de las gotas anteriores. 
4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra. 
5. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80–100 r.p.m. durante 2 minutos


LECTURA E INTERPRETACION
Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación
inmediatamente después de retirar el porta del agitador. La presencia
de aglutinación indica una concentración de HCG igual o superior a
200 UI/L.


CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la
funcionalidad del reactivo de látex, así como modelo de comparación
para la interpretación de los resultados.


VALORES DE REFERENCIA
Suero: 5 – 50 UI/L entre 0,2 – 1 semana de gestación.
Orina: 50 – 5000 UI/L entre 1 – 2,5 semanas de gestación.
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores
de referencia.

RESULTADO:

NEGATIVO 

Biomoleculas

IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLECULAS

BIOMOLECULAS

Introducción:

Toda materia viva está compuesta por un grupo reducido de moléculas combinadas entre sí: el agua y las sales minerales, los hidratos de carbono (o carbohidratos), los lípidos, las proteínas, los ácidos nucleicos, las enzimas, las vitaminas y las hormonas.

Algunas de estas moléculas funcionan como parte estructural de las células y los tejidos del cuerpo de los organismos.

Materiales y sustancias:

·                     10 tubos de ensaye

·                     1 gradilla

·                     Dos vasos de precipitado

·                     1 agitador

·                     1 mechero de Bunsen

·                     2 pinzas para tubo de ensaye

·                     1 gotero

·                     1 pliego de papel estraza

Para carbohidratos:

·                     Reactivo de Fehiling

·                     Acido clorhídrico al 50%

·                     Lugol

Para proteínas:

·                     Reactivo de Biuret

·                     Acido nítrico concentrado

·                     Hidróxido de amonio concentrado

·                     Para lípidos:

·                     Sudan III

Muestras de alimentos:

·                     Trigo

·                     Manzana

·                     Zanahoria

·                     Hígado de pollo

·                     Queso

·                     Habas

Procedimiento:

Para identificar carbohidratos.

1.                 Coloque una pequeña cantidad de las muestra en un tubo de ensayo.

2.                 Agregue 2  gotas de Lugol.

3.                 Observe el color que toma la muestra al reaccionar con el Lugol.

4.                 Repita el procedimiento en los demás alimentos.

5.                 Anote sus observaciones.

 Para identificar lípidos.

1.                 Coloque pequeñas porciones de cada alimento en pedazos de papel estraza.

2.                 Doble el papel con el alimento y presione con los dedos.

3.                 Observa si hay áreas del papel que se vean traslucidas y aparentemente húmedas, lo cual indica que el alimento contiene grasas (prueba positiva).

4.                 Anote sus observaciones.

Para identificar proteínas con aminoácidos aromáticos.

1.                 Agregar 1 ml de ácido nítrico  concentrado a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye, caliente con precaución sujetando el tubo con unas pinzas para tubo de ensaye y metiendo y sacando el tubo de la flama para evitar que se proyecte la solución.

2.                 Espera a que enfrié.

3.                 Deja resbalar por las paredes del tubo 1 ml de hidróxido de amonio sin agitar, de tal forma que se formen dos capas.

4.                 Anote tus observaciones.

 Si en la muestra hay proteínas, se formara un anillo de color naranja entre las dos capas formadas por el ácido nítrico y el hidróxido de amonio.

Resultado:

ALIMENTO	CARBOHIDRATOS	PROTEINAS		LIPIDOS
	LUGOL	BIURET	XANTOPTOTEICA	SUDA III	ESTRAZA
Hígado		ü	ü	ü	ü
Manzana	ü		ü		ü
Zanahoria	ü		ü		ü
Haba	ü	ü	ü		ü
Queso			ü	ü	ü
Trigo	ü		ü		ü