sábado, 10 de mayo de 2014

RETICULOCITOS

Propósito:

Que el alumno aplique la metodología para la cuantificación de Reticulocitos en una muestra de sangre.

Fundamento: 

El Reticulocito es un eritrocito inmaduro que contiene restos de ARN (ácido ribonucleico) ribosomal. Los colorantes supravitales son capaces de precipitar el ARN ribosomal permitiendo la diferenciación entre los Reticulocitos y los eritrocitos maduros.

La cuenta de Reticulocitos es útil para evaluar el recambio eritrocitario, por ejemplo en una anemia hemolítica, donde los eritrocitos por diversas causas se destruyen antes de 120 días, que es su vida media, en el caso de ésta anemia, se destruyen en un corto tiempo y la médula ósea con el propósito de compensar la pérdida de estos eritrocitos, manda a sangre periférica una mayor cantidad de Reticulocitos que al cuantificarlos y obtener cifras elevadas de estas células se puede establecer un diagnóstico.

Estas tinciones son conocidas como supravitales, como la nueva azul de metileno N o de azul de cresilo brillante, estos colorantes se unen, neutralizan y establecen enlaces cruzados con el ARN.
Estas tinciones hacen que el ARN ribosómico y residual se precipiten juntos con las pocas masas restantes de mitocondrias y ferritina (depósito de hierro), en los Reticulocitos, para formar cúmulos y filamentos visibles al microscopio de color azul oscuro (retículo).


Material y Equipo

v  Tubos de ensaye.
v  Portaobjetos.
v  Microscopio.
v  Equipo de Vacutainer.



Colorantes:

v  Nuevo azul de metileno.
v  Azul de cresilo brillante








Técnica:

1.- De una muestra de sangre con anticoagulante, se colocan de dos a tres gotas en un tubo de ensaye.

2.- Adicionar una cantidad igual de colorante nuevo azul de metileno para Reticulocitos.

3.- Mezclar y dejar reposar durante 10 minutos a temperatura ambiente.

4.- Realizar un extendido en un portaobjetos limpio, con una gota de la mezcla.

5.- Dejar secar al aire.

6.- Examinar la preparación con el objetivo de seco fuerte e inmersión.

7.- Contar el número de Reticulocitos existentes por cada 1000 eritrocitos.


Cálculos:

% RETICULOCITOS  =    Reticulocitos en 1000 eritrocitos
                                                          10

Nota: Los Reticulocitos tardan un día en promedio en la circulación, antes de transformarse en eritrocitos maduros. Cuando la anemia es grave, la médula ósea libera los Reticulocitos de manera temprana hacia la circulación, incrementando el tiempo de maduración hasta 3 días, aumentando así, la cuenta de Reticulocitos por acumulación; en estos casos debe realizarse una corrección a la cuenta de Reticulocitos obtenidas.


Valores de referencia: 
ADULTOS: 0.5-2.0 %
RECIEN NACIDOS: 2.5-6.5%

IMAGENES DE LA PRÁCTICA:










1 comentario: